供應 CVNPF,神經(jīng)保護因子ELISA檢測試劑盒 

試劑盒名稱	神經(jīng)保護因子ELISA檢測試劑盒
規(guī)格	48T/96T
品牌	RENJIEBIO
檢測方法	ELISA酶聯(lián)免疫法
檢測波長	450nm
樣本	血清、血漿、細胞上清液等
樣本體積	50~100ul
研究領域	神經(jīng)生物學、新陳代謝、免疫學等
使用范圍	僅用于科研實驗
保存	2~8℃，避光保存

CVNPF,神經(jīng)保護因子ELISA檢測試劑盒操作流程如下：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。　
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl?！?br />（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。　
（6）洗板，同（4）。　
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。　
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。　
（9）洗板，同（4）?！?br />（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。　
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應?！?br />（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。

CVNPF,神經(jīng)保護因子ELISA檢測試劑盒標準曲線計算